夜行バス（やこうバス）とは、高速バスのうち、夜間を中心に走行するバスのことである。
主に距離が遠い都市同士を結んでおり、夜行バスは夜に出発し朝に目的地に到着する。また、座席も昼行バスや近距離高速バスに比べて豪華なものになっており、3列独立シートになっていることも多い。また、バスによっては女性専用車が設定されていることもある。
4列シートの夜行バスも存在し、4列シートの夜行バスでは隣が臭い人やデブの場合苦行となってしまう。